Biotecnología avanzadahttp://hdl.handle.net/10334/25372024-02-18T07:45:51Z2024-02-18T07:45:51ZEfecto de la radiación UV y nitrato en la fotosíntesis y producción de compuestos bioactivos en el alga exótica invasora Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta) = Effect of UV radiation and nitrate on photosynthesis and production of bioactive compounds in the invasive exotic alga Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta)Carvajal Marmoucha, Yasmínhttp://hdl.handle.net/10334/70802023-02-10T01:01:01Z2021-01-01T00:00:00ZEfecto de la radiación UV y nitrato en la fotosíntesis y producción de compuestos bioactivos en el alga exótica invasora Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta) = Effect of UV radiation and nitrate on photosynthesis and production of bioactive compounds in the invasive exotic alga Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta)
Carvajal Marmoucha, Yasmín
Trabajo Fin de Máster en Biotecnología Avanzada. Tutores: Dr. D. Félix Diego López Figueroa ; Dra. Dª. Nathalie Korbee Peinado. Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta) es un alga parda de origen asiático que desde el año 2015 está invadiendo las aguas costeras de Andalucía. Es un alga con gran plasticidad fisiológica y morfológica y que crece tanto en aguas superficiales, expuestas a alta radiación e hidrodinamismo, hasta 30-40 m de profundidad en ambiente esciáfilo. En este TFM se aplica un diseño experimental bifactorial en el que se estudia la influencia de la concentración de nitrato (60, 480 y 900 M) y radiación fotosintética (PAR) y PAR+UV+Azul sobre la actividad fotosintética y acumulación de compuestos bioactivos. Se evalúa la composición bioquímica de compuestos de metabolismo primario (proteínas, pigmentos fotosintéticos, lípidos y carbohidratos) y secundario (polifenoles) y se valora su capacidad antioxidante y fotoprotectora y su aplicación en productos cosmecéuticos. El mayor conocimiento ecofisiológico de esta especie puede contribuir al diseño de estrategias y programas en el marco de plan de gestión y control de la invasión por Ruguloteryx okamurae del ecosistema costero del Mar Mediterráneo. En este trabajo se ha observado una influencia de la radiación UV en la producción de lípidos y carbohidratos, mientras que el nitrógeno ha afectado positivamente en la obtención de proteínas.; Rugulopteryx okamurae (Ochrophyta) is a brown algae of Asiatic origin that since 2015 has been invading the coastal waters of Andalusia. It is an alga with great physiological and morphological plasticity and that grows in surface waters, exposed to high radiation and hydrodynamics, up to 30-40 m deep in a shaded environment. In this TFM, a bifactorial design is applied in which the influence of the concentration of nutrients and photosynthetic radiation (PAR) and PAR+UV+Blue on the photosynthetic activity and accumulation of bioactive compounds is studied. The biochemical composition of compounds of primary metabolism (proteins, photosynthetic pigments, lipids and carbohydrates) and secondary (polyphenols) are evaluated and their antioxidant and photoprotective capacity and their application in cosmeceutical products are evaluated. The increase in the ecophysiological knowledge of this species can contribute to the design of strategies and programs within the framework of the management and control plan of the invasion by R. okamurae of the coastal ecosystem of the Mediterranean Sea. In this work an influence of UV radiation has been observed in the production of lipids and carbohydrates, while nitrogen has positively affected the production of proteins.
67 páginas.
2021-01-01T00:00:00ZCaracterización de un factor de transcripción de fresa implicado en la autofagia empleando un sistema heterólogo y estudio de posibles dianasPeralta García, Raúlhttp://hdl.handle.net/10334/70792023-02-10T01:00:59Z2022-01-01T00:00:00ZCaracterización de un factor de transcripción de fresa implicado en la autofagia empleando un sistema heterólogo y estudio de posibles dianas
Peralta García, Raúl
Trabajo Fin de Máster en Biotecnología Avanzada. Tutoras: Dra. Dª. Victoria Sánchez Vera ; Dra. Dª. Noemí Ruiz López. La fresa (Fragaria x ananassa) es un cultivo de elevada importancia económica en el sur de
España. Se trata de un fruto no climatérico, por lo que su maduración en la planta es esencial
para el correcto desarrollo de sus características organolépticas. La autofagia es un sistema de
reciclaje de componentes celulares y se ha demostrado que tiene un papel fundamental en la
maduración de la fresa. Este TFM se ha centrado en estudiar un posible regulador de la
autofagia durante la maduración del fruto de fresa. En Arabidopsis, el factor de transcripción
(FT) TGA9 (AtTGA9) actúa como regulador de la autofagia sobre genes relacionados con
ella (genes ATG). Entre otras, se ha descrito la interacción entre AtTGA9-ATG8 y es por ello
que este trabajo y sus futuros avances se centran en abordar esta relación en F. x ananassa.
En este proyecto se ha clonado AtTGA9 y se ha estudiado a través de un sistema heterólogo la
localización subcelular de TGA9 de F. x ananassa (FaTGA9) y AtTGA9 (empleado como
control). Ambas proteínas se han localizado en el núcleo celular, lo que indica que FaTGA9
también podría actuar como FT regulando la autofagia. Por otro lado, se han analizado
posibles dianas de esta proteína, y entre ellas, se ha puesto a punto la amplificación de los
promotores de diferentes genes ATG8, que codifica para unas proteínas esenciales en el
proceso de la autofagia.; Strawberry (Fragaria x Ananassa) is a high economic importance crop in the south of Spain.
It is a non-climacteric fruit, so its maturation in the plant is essential for the suitable
development of its organoleptic characteristics. Autophagy is a cellular component recycling
system and it has been shown that it has a fundamental role in strawberry maturation. This
master thesis has focused on studying a possible autophagy regulator during strawberry fruit
ripening. In Arabidopsis, the transcription factor (TF) TGA9 (AtTGA9) acts as regulator of
Autophagy-related genes (ATG genes). Among others, the interaction between
AtTGA9-ATG8 has been described and that is why this study focuses on investigating this
relationship in F. x Ananassa. In this research, AtTGA9 has been cloned and the subcellular
location of F. x Ananassa TGA9 (FaTGA9) and AtTGA9 (used as control) has been studied
through a heterologous system. Both proteins have been located in the cell nucleus, this
indicates that FaTGA9 could also act as TF regulating autophagy. On the other hand, possible
targets of this protein have been analyzed, and among them, the promoters’s amplification
protocol of different ATG8 genes, which encodes for essential proteins in the autophagy
process, has been established.
48 páginas.
2022-01-01T00:00:00ZDeterminación del contenido de K+ durante la maduración del fruto de fresa mediante técnicas electrofisiológicas y espectrometría atómica = Determination of K+ content during strawberry fruit ripening by electrophysiological techniques and atomic spectrometryRodríguez Hiraldo, Claudiahttp://hdl.handle.net/10334/70782023-02-10T01:00:59Z2022-01-01T00:00:00ZDeterminación del contenido de K+ durante la maduración del fruto de fresa mediante técnicas electrofisiológicas y espectrometría atómica = Determination of K+ content during strawberry fruit ripening by electrophysiological techniques and atomic spectrometry
Rodríguez Hiraldo, Claudia
Trabajo Fin de Máster en Biotecnología Avanzada. Tutores: Dr. D. José Ángel Mercado Carmona; Dra. Dª. Lourdes Rubio Valverde. El ion potasio (K+) es el macronutriente más abundante en la célula vegetal y es fundamental para numerosas funciones de la planta, incluyendo el rendimiento y la calidad del fruto. Por ello, el estudio de su dinámica celular durante el desarrollo tiene una gran importancia, ya que puede ser un factor esencial que determine la vida poscosecha del fruto. El objetivo de este proyecto es determinar y comparar el contenido de potasio en distintos estadios de maduración del fruto de fresa. Para ello, se utilizaron frutos del cv. ‘Chandler’ control sin transformar y dos líneas de fresas (PG29 y 18A37) que contienen un gen de poligalacturonasa (FaPG1) en antisentido (PG29) o editado (18A37). Los frutos de estas líneas transgénicas muestran una vida postcosecha más prolongada que los frutos control. Para la cuantificación del K+ se utilizaron dos procedimientos distintos, a través de técnicas electrofisiológicas y espectrometría atómica (EAT). En el primer caso, se ha optimizado la medida del potencial de membrana de células del fruto de fresa con técnicas electrofisiológicas, se han estimado las concentraciones de potasio citosólico a partir del potencial de difusión, y se ha analizado la concentración de iones por EAT. Los resultados obtenidos muestran que el K+ citosólico disminuye conforme avanza la maduración del fruto en fresas control. Sin embargo, los frutos transgénicos en estadio verde contienen menos K+ citosólico que los frutos control. La concentración de potasio total en el tejido del receptáculo fue similar en fresas control y en transgénicas PG29, y en estos dos genotipos a lo largo de la maduración. Por el contrario, los niveles de Mn, Zn, Ca, Mg, Na, así como el carbono y el nitrógeno total presentan disminuciones significativas en el transcurso de este proceso. Los resultados obtenidos sugieren que hay una posible relación entre firmeza de fruto y contenido interno de K+, y éste a su vez, se ve modificado al inhibir el gen FaPG1. Como posibles perspectivas de investigación futuras, entre otras, sería de gran interés estudiar el papel que tiene la poligalacturonasa en la acumulación del potasio en fases tempranas de la maduración; el mecanismo por el cual el potasio podría viajar durante la maduración a otras partes del tejido del receptáculo, como la vacuola; y la causa de que a medida que progresa este proceso, la mayoría de los iones sufran una disminución.; The potassium ion (K+) is the most abundant macronutrient in the plant cell and is essential for numerous plant functions, including yield and fruit quality. Therefore, the study of its cellular dynamics during development is of great importance, since it can be an essential factor that determines the postharvest life of the fruit. The objective of this project is to determine and compare the potassium content at different stages of ripening of the fruit of cv. ‘Chandler’ untransformed control strawberries and two strawberry lines (PG29 and 18A37) containing an antisense (PG29) or edited (18A37) polygalacturonase (FaPG1) gene. he fruits of these transgenic lines show a longer postharvest life than the control fruits. For the quantification of K+, two different procedures were used, through electrophysiological techniques and atomic spectrometry (EAT). In the first case, the measurement of the membrane potential of strawberry fruit cells has been optimized with electrophysiological techniques, cytosolic potassium concentrations have been estimated from the diffusion potential, and the ion concentration has been analyzed by EAT. The results obtained show that cytosolic K+ decreases as fruit ripening progresses in control strawberries. However, green-stage transgenic fruits contain less cytosolic K+ than control fruits. Total potassium concentration in receptacle tissue was similar in control and transgenic PG29 strawberries, and in these two genotypes throughout ripening. On the contrary, the levels of Mn, Zn, Ca, Mg, Na, as well as carbon and total nitrogen show significant decreases during this process. The results obtained suggest that there is a possible relationship between fruit firmness and internal K+ content, and this, in turn, is modified by inhibiting the FaPG1 gene. As possible future research perspectives, among others, it would be of great interest to study the role of polygalacturonase in the accumulation of potassium in early phases of maturation; the mechanism by which potassium might travel during maturation to other parts of the receptacle tissue, such as the vacuole; and the cause that as this process progresses, most of the ions suffer a decrease.
36 páginas.
2022-01-01T00:00:00ZAnálisis de la variabilidad natural en la región promotora del gen carotenoid cleavage dioxygenase 4 (CCD4)-B in fragaria spp. = Analysis of natural variability in the promoter region of the carotenoid cleavage dioxygenase 4 (CCD-4)-B gene in fragaria spp.Sánchez Mediero, Paulahttp://hdl.handle.net/10334/70772023-02-10T01:00:58Z2022-01-01T00:00:00ZAnálisis de la variabilidad natural en la región promotora del gen carotenoid cleavage dioxygenase 4 (CCD4)-B in fragaria spp. = Analysis of natural variability in the promoter region of the carotenoid cleavage dioxygenase 4 (CCD-4)-B gene in fragaria spp.
Sánchez Mediero, Paula
Trabajo Fin de Máster en Biotecnología Avanzada. Tutoras: Dra. Dª. Cristina Castillejo Mangado ; Dra. Dª. Iraida Amaya Saavedra. La fresa cultivada, Fragaria x ananassa, es una especie octoploide que proviene de la hibridación de dos especies octoploides silvestres (F. chiloensis y F. virginiana). Las fresas son cultivadas en todo el mundo debido a que su fruto es muy apreciado por su olor, aroma, textura y sabor, además estos frutos tienen grandes beneficios para la salud. El color de la fresa es una cualidad muy importante para los consumidores, y aquí la mejora genética juega un papel imprescindible mediante la selección de fenotipos de interés. En el laboratorio de Mejora y Biotecnología de fresa del IFAPA de Málaga, se comenzó a estudiar la variación interna de color amarillo/blanco del fruto de la fresa. La enzima CCD4 escinde los carotenoides (responsables del color amarillo) a apocarotenoides, los cuales, por lo general, no proporcionan ninguna coloración. En la población de mapeo usada (SS x FcL) en estos estudios previos, se comprobó que la expresión del gen que codifica la enzima CCD4 en esta población, está regulada por una inserción en el promotor de este. En este trabajo, se aborda el estudio de la secuencia del promotor del gen FcCCD4- B, de varias accesiones de la especie F. chiloensis. Para ello se ha amplificado, clonado y secuenciado el promotor del gen de diferentes accesiones y cultivares. A lo largo del trabajo se muestran las diferencias entre las secuencias. Así, se ha podido concluir que la expresión del gen FcCCD4-B puede estar ligada tanto a la presencia o ausencia de una inserción en la secuencia del promotor como a otras mutaciones encontradas. Estas mutaciones encontradas que son en su mayoría SNPs, pueden tener una gran repercusión en el desarrollo de nuevos marcadores moleculares en fresa los cuales son muy importantes y cada vez más utilizados para la mejora.; The cultivated strawberry, Fragaria x ananassa, is an octoploid species that comes from the hybridisation of two wild octoploid species (F. chiloensis and F. virginiana). Strawberries are cultivated all over the world because their fruit is highly appreciated for its smell, aroma, texture and taste, and they also have great health benefits. Strawberry colour is a very important quality for consumers, and here genetic improvement plays an essential role through the selection of phenotypes of interest. In the Strawberry Breeding and Biotechnology Laboratory of IFAPA in Malaga, the internal yellow/white colour variation of the strawberry fruit was studied. The CCD4 enzyme cleaves carotenoids (responsible for the yellow colour) to apocarotenoids, which usually do not provide any colouring. In the mapping population used (SS x FcL) in these previous studies, the expression of the gene encoding the CCD4 enzyme in this population was found to be regulated by an insertion in the CCD4 promoter. In this work, we study the sequence of the promoter of the FcCCD4-B gene in several accessions of the species F. chiloensis. For this purpose, the gene promoter of different accessions and cultivars has been amplified, cloned and sequenced. The differences between the sequences are shown throughout the work. Thus, it has been possible to conclude that the expression of the FcCCD4-B gene can be linked to the presence or absence of an insertion in the promoter sequence as well as to other mutations found. These mutations found, which are mostly SNPs, can have a great impact on the development of new molecular markers in strawberry, which are very important and increasingly used for breeding.
43 páginas.
2022-01-01T00:00:00Z