Caracterización de líneas transgénicas de arabidopsis para el estudio de la supresión de silenciamiento transcripcional en geminivirus

Abstract

Trabajo Fin de Máster. Dirección: Araceli Castillo Garriga. Los geminivirus pertenecen a una familia de virus fitopatógenos denominada “Geminiviridae”, cuyo genoma es un ADN monocatenario circular de aproximadamente 3000 pares de bases, que se replica usando moléculas intermediarias de ADN doble cadena dentro de las células vegetales infectadas. Los viriones están constituidos por dos icosaedros incompletos, y cada uno consta de 110 subunidades de proteína de cubierta, de 29-30kD cada una: La familia “Geminiviridae” está dividida en 4 géneros: a) "Mastrevirus": el virus representante de este género es el “Maize streak virus”, MSV b) "Curtovirus": el virus representante de este género es el “Beet curly top virus”, BCTV c) "Topocuvirus": el virus representante de este género es el “Tomato pseudo-curly top virus”, TPCTV d) “Begomovirus”: el virus representante de este género es el “Tomato yellow leafcurl virus”, TYLCV. La enfermedad del rizado amarillo del tomate fue descrita por primera vez en Israel en 1939, encontrándose actualmente distribuida por las zonas cálidas y templadas de todo el mundo. La enfermedad está causada por un complejo de virus que pertenecen al género “Begomovirus”. Las plantas de tomate infectadas por “Tomato yellow leafcurl virus” (TYLCVs) presentan enanismo, con los filos de la hoja rizados en ambos sentidos y las hojas jóvenes son ligeramente cloróticas. En las plantas con una infección reciente, los frutos puede que no se produzcan y si se producen son enanos y carentes de valor comercial. Nuestros resultados muestran que C3 revierte el silenciamiento transcripcional del transgén GUS, indicando que C3 es un supresor del silenciamiento transcripcional. Ya que Rep, como C3 también reprime la expresión de los genes que mantienen la metilación del ADN en plantas (MET1 y CMT3), es sorprendente que no hayamos detectado de forma tan clara como en C3 la reactivación de GUS al inducir la presencia de Rep con estradiol en la tinción histoquímica. Por este motivo creemos necesario realizar otro ensayo independiente en el que se compruebe la reactivación del transgen GUS así como otro tipo de ensayos que permitan elucidar si Rep actúa también como supresor del silenciamiento transcripcional.