Caracterización de un factor de transcripción de fresa implicado en la autofagia empleando un sistema heterólogo y estudio de posibles dianas

Abstract

Trabajo Fin de Máster en Biotecnología Avanzada. Tutoras: Dra. Dª. Victoria Sánchez Vera ; Dra. Dª. Noemí Ruiz López. La fresa (Fragaria x ananassa) es un cultivo de elevada importancia económica en el sur de España. Se trata de un fruto no climatérico, por lo que su maduración en la planta es esencial para el correcto desarrollo de sus características organolépticas. La autofagia es un sistema de reciclaje de componentes celulares y se ha demostrado que tiene un papel fundamental en la maduración de la fresa. Este TFM se ha centrado en estudiar un posible regulador de la autofagia durante la maduración del fruto de fresa. En Arabidopsis, el factor de transcripción (FT) TGA9 (AtTGA9) actúa como regulador de la autofagia sobre genes relacionados con ella (genes ATG). Entre otras, se ha descrito la interacción entre AtTGA9-ATG8 y es por ello que este trabajo y sus futuros avances se centran en abordar esta relación en F. x ananassa. En este proyecto se ha clonado AtTGA9 y se ha estudiado a través de un sistema heterólogo la localización subcelular de TGA9 de F. x ananassa (FaTGA9) y AtTGA9 (empleado como control). Ambas proteínas se han localizado en el núcleo celular, lo que indica que FaTGA9 también podría actuar como FT regulando la autofagia. Por otro lado, se han analizado posibles dianas de esta proteína, y entre ellas, se ha puesto a punto la amplificación de los promotores de diferentes genes ATG8, que codifica para unas proteínas esenciales en el proceso de la autofagia.

Strawberry (Fragaria x Ananassa) is a high economic importance crop in the south of Spain. It is a non-climacteric fruit, so its maturation in the plant is essential for the suitable development of its organoleptic characteristics. Autophagy is a cellular component recycling system and it has been shown that it has a fundamental role in strawberry maturation. This master thesis has focused on studying a possible autophagy regulator during strawberry fruit ripening. In Arabidopsis, the transcription factor (TF) TGA9 (AtTGA9) acts as regulator of Autophagy-related genes (ATG genes). Among others, the interaction between AtTGA9-ATG8 has been described and that is why this study focuses on investigating this relationship in F. x Ananassa. In this research, AtTGA9 has been cloned and the subcellular location of F. x Ananassa TGA9 (FaTGA9) and AtTGA9 (used as control) has been studied through a heterologous system. Both proteins have been located in the cell nucleus, this indicates that FaTGA9 could also act as TF regulating autophagy. On the other hand, possible targets of this protein have been analyzed, and among them, the promoters’s amplification protocol of different ATG8 genes, which encodes for essential proteins in the autophagy process, has been established.